Reaction Biology正在與Promega合作，使用NanoBRET技術(shù)提供目標(biāo)參與分析。NanoBRET靶標(biāo)參與細(xì)胞內(nèi)激酶測(cè)定法可測(cè)量完整細(xì)胞中特定靶標(biāo)激酶的化合物結(jié)合，是除細(xì)胞磷酸化測(cè)定法以外我們提供的兩種基于細(xì)胞的激酶測(cè)定法之一。

NanoBRET分析采用能量轉(zhuǎn)移技術(shù)，旨在測(cè)量活細(xì)胞中的分子接近性。NanoBRET靶標(biāo)參與細(xì)胞內(nèi)激酶測(cè)定法通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性置換NanoBRET示蹤劑來(lái)測(cè)定測(cè)試化合物的表觀親和力，該示蹤劑可逆地結(jié)合到細(xì)胞中的NanoLuc熒光素酶激酶融合構(gòu)建體上。細(xì)胞內(nèi)靶標(biāo)的結(jié)合和選擇性在生理上是相關(guān)的，并且對(duì)于化合物的藥理機(jī)制是至關(guān)重要的。生物化學(xué)和生物物理分析可以在體外識(shí)別激酶抑制劑，而NanoBRET分析則是確定化合物與細(xì)胞中靶激酶直接相互作用的強(qiáng)大工具。

• 該測(cè)定提供化合物與激酶靶標(biāo)結(jié)合親和力的實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)，包括占用時(shí)間
• 完整的細(xì)胞就離子和ATP的濃度，pH或輔因子而言，為化合物激酶的相互作用提供了一個(gè)相關(guān)的環(huán)境。另外，為了在細(xì)胞內(nèi)部發(fā)揮作用，化合物必須克服細(xì)胞膜。
• 適用于高通量篩選

該測(cè)定法是一種化合物競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定法，它依賴于熒光素酶標(biāo)記的激酶和熒光示蹤劑之間的生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）。定量和特異性是NanoBRET系統(tǒng)的關(guān)鍵屬性。